Хромосомасының НО локусында Lentinula edodes саңырауқұлағының целлобиогидролаза гені бар рекомбинантты Saccharomyces cerevisiae штаммын алу.

S. M. Taipakova; I. T. Smekenov; A. K. Bissenbaev

Автор(и)

S. M. Taipakova НИИ проблем биологии и биотехнологии, КазНУ им. аль-Фараби, г. Алматы
I. T. Smekenov НИИ проблем биологии и биотехнологии, КазНУ им. аль-Фараби, г. Алматы
A. K. Bissenbaev НИИ проблем биологии и биотехнологии, КазНУ им. аль-Фараби, г. Алматы

Ключові слова:

целлобиогидролаза, Lentinula edodes, Saccharomyces cerevisiae, геномная интеграция, α- целлобиогидролаза, геномдық интеграция, α-фактор,

Анотація

Создание рекомбинантного штамма Saccharomyces cerevisiae с геном целлобиогидролазы гриба Lentinula edodes в HO локусе хромосомы С помощью генно-инженерных методов сконструирована pHO-GAPDH-α-cel7A-myc-6His-KanMX4-HO интегральная конструкция, включающая ген целлобиогидролазы cel7A гриба Lentinula edodes с сигнальным пептидом α-фактора дрожжей, Мyc-эпитопом и гистидиновым хвостом. Создан новый стабильный штамм дрожжей с геном целлобиогидролазы cel7A гриба L. edodes. Хромосомная интеграция гена целлобиогидролазы cel7A гриба L. edodes в НО локус генома дрожжей была подтверждена методом ПЦР. Ключевые слова:. Гендік инженериялық әдістер көмегімен ашытқы α-факторының сигналды пептиді мен myc-эпитоп және 6xHis құйрығы бар Lentinula edodes саңырауқұлағының целлобиогидролазы ферментін кодтайтын сel7А кДНК гені енгізілген интегральді pHO-GAPDH-α-cel7A-myc-6His-KanMX4-HO вектор құрастырылды. L. edodes саңырауқұлағының целлобиогидролаза ферментін эффективті түрде экспрессиялауға және дақылдау ортасына секрециялауға қабілетті жаңа тұрақты ашытқы штаммы алынды. L. edodes саңырауқұлағының целлобиогидролаза cel7A генінің ашытқы геномының НО локусына интеграциялануы ПЦР көмегімен дәлелденді.