Хромосомасының НО локусында Lentinula edodes саңырауқұлағының целлобиогидролаза гені бар рекомбинантты Saccharomyces cerevisiae штаммын алу.
Ключевые слова:
целлобиогидролаза, Lentinula edodes, Saccharomyces cerevisiae, геномная интеграция, α- целлобиогидролаза, геномдық интеграция, α-фактор,Аннотация
Создание рекомбинантного штамма Saccharomyces cerevisiae с геном целлобиогидролазы гриба Lentinula edodes в HO локусе хромосомы С помощью генно-инженерных методов сконструирована pHO-GAPDH-α-cel7A-myc-6His-KanMX4-HO интегральная конструкция, включающая ген целлобиогидролазы cel7A гриба Lentinula edodes с сигнальным пептидом α-фактора дрожжей, Мyc-эпитопом и гистидиновым хвостом. Создан новый стабильный штамм дрожжей с геном целлобиогидролазы cel7A гриба L. edodes. Хромосомная интеграция гена целлобиогидролазы cel7A гриба L. edodes в НО локус генома дрожжей была подтверждена методом ПЦР. Ключевые слова:. Гендік инженериялық әдістер көмегімен ашытқы α-факторының сигналды пептиді мен myc-эпитоп және 6xHis құйрығы бар Lentinula edodes саңырауқұлағының целлобиогидролазы ферментін кодтайтын сel7А кДНК гені енгізілген интегральді pHO-GAPDH-α-cel7A-myc-6His-KanMX4-HO вектор құрастырылды. L. edodes саңырауқұлағының целлобиогидролаза ферментін эффективті түрде экспрессиялауға және дақылдау ортасына секрециялауға қабілетті жаңа тұрақты ашытқы штаммы алынды. L. edodes саңырауқұлағының целлобиогидролаза cel7A генінің ашытқы геномының НО локусына интеграциялануы ПЦР көмегімен дәлелденді.Библиографические ссылки
1 Синицын А.П., Гусаков A.B., Черноглазов В.М. Биоконверсия лигноцеллюлозных материалов. – М.; МГУ,
1995. -224с.
2 Teeri T.T. Crystalline cellulose degradation: new insight into the function of cellobiohydrolases // Trends in Biotechnology.– 1997. – V. 15. – P. 160-167.
3 Bhat M.K. Cellulases and related enzymes in biotechnology // Biotechnol. Adv. – 2000. – Vol.18. – P.355-383.
4 Lynd L.R., van Zyl W.H., McBride J. E., Laser M. Consolidated bioprocessing of cellulosic biomass: an update //Current Opinion in Biotechnology. -2005. -Vol.16. - № 5. – P. 577–583.
5 Hong J., Tamaki H., Akiba S., Yamamoto K., Kumagai H. Cloning of a gene encoding a highly stable endo-b-1,4-β-
glucanase from Aspergillus niger and its expression in yeast // J. Biosci. Bioeng. – 2001. –Vol.92. - P. 434-441.
6 Voth W.P., Richards J.D., Shaw J.M., Stillman D.J. Yeast vectors for integration at the HO locus // Nucleic Acids
Res. -2001. –Vol.29. - №12. – P. 354-363.
7 MichaelisS., and Herskowitz I., et al.The a-factor pheromone of Saccharomyces cerevisiae is essential for mating //Mol. Cell Biol. -1988. - Vol.8. - № 3. –Р.1309-18.
8 Strazdis J.R., MacKay V.L. Induction of yeast mating pheromone a-factor by alpha cells // Nature. - 1983. –Vol. 305.- № 5934. –Р.543-5.
9 Taipakova S.M., Smailov B.B., Stanbekova G.E, Bissenbaev A.K. Cloning and expression of Lentinula edodes cellobiohydrolase gene in E. Coli and characterization of recombinant enzyme // Journal of Cell and Molecular biology. -2011. – Vol. 9. - №1. –P.53-63.
10 Бисенбаев А.К. Тайпакова С.М. Клонирование и экспрессия кДНК целлобиогидролазы СEL7A гриба Lentinula edodes в про- и эукариотических системах и изучение физико-химических свойств рекомбинантного
фермента // Известия НАН РК. Серия биологическая и медицинская. - 2012. - №3(291). - С. 39-46.
1995. -224с.
2 Teeri T.T. Crystalline cellulose degradation: new insight into the function of cellobiohydrolases // Trends in Biotechnology.– 1997. – V. 15. – P. 160-167.
3 Bhat M.K. Cellulases and related enzymes in biotechnology // Biotechnol. Adv. – 2000. – Vol.18. – P.355-383.
4 Lynd L.R., van Zyl W.H., McBride J. E., Laser M. Consolidated bioprocessing of cellulosic biomass: an update //Current Opinion in Biotechnology. -2005. -Vol.16. - № 5. – P. 577–583.
5 Hong J., Tamaki H., Akiba S., Yamamoto K., Kumagai H. Cloning of a gene encoding a highly stable endo-b-1,4-β-
glucanase from Aspergillus niger and its expression in yeast // J. Biosci. Bioeng. – 2001. –Vol.92. - P. 434-441.
6 Voth W.P., Richards J.D., Shaw J.M., Stillman D.J. Yeast vectors for integration at the HO locus // Nucleic Acids
Res. -2001. –Vol.29. - №12. – P. 354-363.
7 MichaelisS., and Herskowitz I., et al.The a-factor pheromone of Saccharomyces cerevisiae is essential for mating //Mol. Cell Biol. -1988. - Vol.8. - № 3. –Р.1309-18.
8 Strazdis J.R., MacKay V.L. Induction of yeast mating pheromone a-factor by alpha cells // Nature. - 1983. –Vol. 305.- № 5934. –Р.543-5.
9 Taipakova S.M., Smailov B.B., Stanbekova G.E, Bissenbaev A.K. Cloning and expression of Lentinula edodes cellobiohydrolase gene in E. Coli and characterization of recombinant enzyme // Journal of Cell and Molecular biology. -2011. – Vol. 9. - №1. –P.53-63.
10 Бисенбаев А.К. Тайпакова С.М. Клонирование и экспрессия кДНК целлобиогидролазы СEL7A гриба Lentinula edodes в про- и эукариотических системах и изучение физико-химических свойств рекомбинантного
фермента // Известия НАН РК. Серия биологическая и медицинская. - 2012. - №3(291). - С. 39-46.
Как цитировать
Taipakova, S. M., Smekenov, I. T., & Bissenbaev, A. K. (2015). Хромосомасының НО локусында Lentinula edodes саңырауқұлағының целлобиогидролаза гені бар рекомбинантты Saccharomyces cerevisiae штаммын алу. Вестник КазНУ. Серия биологическая, 60(2), 352–355. извлечено от https://bb.kaznu.kz/index.php/biology/article/view/971
Выпуск
Раздел
БИОТЕХНОЛОГИЯ
