Сравнение трансляционных энхансеров при синтезе in vitro белков оболочки A27L и L1R вируса оспы овец.  Қой шешегі вирусы қабықшасының A27L мен L1R белоктары in vitro түзілгенде трансляциялық энхансерлерін салыстыру

D. K. Beisenov; G. E. Stanbekova; A. V. Zhigailov; B. K. Iskakov

Авторы

D. K. Beisenov Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина
G. E. Stanbekova Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина
A. V. Zhigailov Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина
B. K. Iskakov Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина

Ключевые слова:

энхансеры трансляции мРНК, бесклеточная система растений, синтез in vitro белков оболочки A27L и L1R, вирус оспы овец. мРНҚ трансляцияның күшейткіштер, бидай ұрығының жүйесі, қабықшасының A27L мен L1R белоктарды in vitro синтездеу, қой шешегі вирусы.

Аннотация

Работа посвящена сравнению эффективности вирусных и искусственных усилителей трансляции (энхансеров) при синтезе белков оболочки A27L и L1R вируса оспы овец в бесклеточной системе из зародышей пшеницы. Для сравнения использовались 5'-нетранслируемые последовательности (НТП) геномных РНК Y вируса картофеля (PVY), вируса гравировки табака (TEV), геномной РНК-4 вируса мозаики люцерны (AMV),искусственная нуклеотидная последовательность 5xARC1, а также 3'-НТП геномной РНК вируса табачной мозаики (TMV). Оценка эффективности усиления трансляции проводилась флуориметрически с помощью репортерного белка β-глюкуронидазы (GUS) и с помощью иммуноблотинга белков A27L и L1R. Показано, что анализируемые 5'-НТП значительно повышают синтез белков в сравнении с произвольной нуклеотидной последовательностью (pl), не обладающей свойствами трансляционного энхансера. Жұмыс қабықшасының A27L мен L1R белоктары in vitro бидай ұрығының жүйесінде түзілгенде вирустардың жəне жасанды трансляциялық күшейткіштерінің (энхансерлерінің) тиімділігіне арналған.Салыстыру үшін картоп Ү вирусының геномдық РНҚ (PVY), темекі қырнақшы вирусының (TEV),жоңышқа əшекей вирусының геномдық РНҚ-4 (AMV), 5xARC1 жасанды тізбегі, жəне темекі əшекей вирусының геномдық РНҚ (TMV) пайдаланылды. Трансляция күшейуінің тиімділігі репортерлік белок β- глюкуронидазаның (GUS) флуориметриясы жəне A27L мен L1R белоктары иммуноблотингі көмегімен өткізілді. Сыналған 5'-ТТ, белоктар түзілуін трансляциялық энхансер қасиеті жоқ кездейсоқ жасалған нуклеотид тізбегімен (pl) салыстырғанда, əжептəуір өсіреді.