Молекулярная индентификация лектин-связывающих сайтов при дифференциальном сиалилировании эпидермального фактора роста.Эпидермальды өсу факторының дифференцияльды сиалилденуінде лектин-байланыстырушы сайттарды молекулалық идентификациялау

Haitham. A. Badr; Leyla B. Djansugurova; Chen-Zhong Li

Авторы

Haitham. A. Badr Department of Molecular Biology and Genetics, Faculty of Biology and Biotechnology, Al-Farabi Kazakh National University, Laboratory of Molecular Genetics, Institute of General Genetics and Cytology, Miami, USA. Laboratory of Nanobioengineering and Bioelectronics, Department of Biomedical Engineering, Florida International University
Leyla B. Djansugurova Department of Molecular Biology and Genetics, Faculty of Biology and Biotechnology, Al-Farabi Kazakh National University, Laboratory of Molecular Genetics, Institute of General Genetics and Cytology, Miami, USA
Chen-Zhong Li Laboratory of Nanobioengineering and Bioelectronics, Department of Biomedical Engineering, Florida International University

Ключевые слова:

биомаркеры рака, рецептор эпидермального ростового фактора, сиалилирование, лектины, голодание. ісік аурулардың биомаркерлері, эпидермалды өсу фактордың рецепторы, сиалилдеу, лектиндер, аштық

Аннотация

Семейство рецепторов эпидермального фактора роста (EGFR) играет важнейшую роль в развитии много-клеточных организмов. Мутации и гиперэкспрессия EGF-рецепторов может вызывать различные заболевания.Известно, что внеклеточные домены EGFR, отвечающие за связывание с лигандами, довольно сильно сиалилированы. Мы провели дизайн лектин-метаболического исследования, позволяющего провести прямое сравнение по уровню сиалилирования внеклеточного домена рецептора ErbB1 (или HER1) между культурами эпителиальных клеток молочной железы, представляющих норму (HB4A) и рак (T47D). Обработка клеточных культур HB4A и T47D сиаловой кислотой в условиях голода вызывала увеличение связывания сиаловой кислоты с внеклеточным доменом ErbB1, что продемонстрировано Вестерн-блоттингом и иммуннопреципитацией. Кроме того, иммунопреципитация 3-х лектинов выявила, что наиболее сильную реакцию в отношении раковых клеток проявлял лектин MAL-I (Maackia amurensis agglutinin I). Мы предполагаем, что обработанные сиаловой кислотой T47D клетки увеличивают активность Neu5Acα2 → 3Gal на клеточной поверхности. Таким образом, MAL-I лектин можно использовать для визуализации молекулярных различий между здоровыми и больными клетками. Көп клеткалы организмдерде эпидермальды өсу факторы (EGFR) рецепторларының тұқымдасы үлкен рөл атқарады. Организмде EGF-рецепторларының мутациясы және гиперэкспрессиясы әртүрлі ауруларды тудыруы мүмкін. Әртүрлі лигандтардың байланысуына жауапты клеткааралық EGFR домендері сиалилденген болып та- былады. Бұл жұмыста сүт бездерінің қалыпты (HB4A) және ісік (T47D) эпителиальды клеткалары арасында ErbB1 (немесе HER1) клеткааралық домен рецепторларында сиалилдену деңгейін тексеру мақсатында лектин-метаболитті зерттеулер жүргізілді. HB4A және T47D клеткаларын сиал қышқылымен өңдеу клеткааралық