Молекулярная индентификация лектин-связывающих сайтов при дифференциальном сиалилировании эпидермального фактора роста.Эпидермальды өсу факторының дифференцияльды сиалилденуінде лектин-байланыстырушы сайттарды молекулалық идентификациялау
Ключевые слова:
биомаркеры рака, рецептор эпидермального ростового фактора, сиалилирование, лектины, голодание. ісік аурулардың биомаркерлері, эпидермалды өсу фактордың рецепторы, сиалилдеу, лектиндер, аштықАннотация
Семейство рецепторов эпидермального фактора роста (EGFR) играет важнейшую роль в развитии много-клеточных организмов. Мутации и гиперэкспрессия EGF-рецепторов может вызывать различные заболевания.Известно, что внеклеточные домены EGFR, отвечающие за связывание с лигандами, довольно сильно сиалилированы. Мы провели дизайн лектин-метаболического исследования, позволяющего провести прямое сравнение по уровню сиалилирования внеклеточного домена рецептора ErbB1 (или HER1) между культурами эпителиальных клеток молочной железы, представляющих норму (HB4A) и рак (T47D). Обработка клеточных культур HB4A и T47D сиаловой кислотой в условиях голода вызывала увеличение связывания сиаловой кислоты с внеклеточным доменом ErbB1, что продемонстрировано Вестерн-блоттингом и иммуннопреципитацией. Кроме того, иммунопреципитация 3-х лектинов выявила, что наиболее сильную реакцию в отношении раковых клеток проявлял лектин MAL-I (Maackia amurensis agglutinin I). Мы предполагаем, что обработанные сиаловой кислотой T47D клетки увеличивают активность Neu5Acα2 → 3Gal на клеточной поверхности. Таким образом, MAL-I лектин можно использовать для визуализации молекулярных различий между здоровыми и больными клетками. Көп клеткалы организмдерде эпидермальды өсу факторы (EGFR) рецепторларының тұқымдасы үлкен рөл атқарады. Организмде EGF-рецепторларының мутациясы және гиперэкспрессиясы әртүрлі ауруларды тудыруы мүмкін. Әртүрлі лигандтардың байланысуына жауапты клеткааралық EGFR домендері сиалилденген болып та- былады. Бұл жұмыста сүт бездерінің қалыпты (HB4A) және ісік (T47D) эпителиальды клеткалары арасында ErbB1 (немесе HER1) клеткааралық домен рецепторларында сиалилдену деңгейін тексеру мақсатында лектин-метаболитті зерттеулер жүргізілді. HB4A және T47D клеткаларын сиал қышқылымен өңдеу клеткааралықБиблиографические ссылки
1 Ohtsubo K., and Marth J.D. Glycosylation in cellular mechanisms of health and disease // Cell. 2006. V. 126. P. 855-67.
2 Exfoliation D. Turns that favor glycosylation // Science. 2011. V. 331. P. 507.
3 Du J., Meledeo M.A., Wang Z., Khanna H.S., Paruchuri V.D.P., and Yarema K.J. Metabolic glycoengineering: Sialic acid and
beyond // Glycobiology. 2009. V. 12. P. 1382-1401.
4 Sharon N. Lectins: Carbohydrate-specific Reagents and Biological Recognition Molecules // J. Biol. Chem. 2007. V. 282. P.
2753-64.
5 Varki N.M. and Varki A. Diversity in cell surface sialic acid presentations: implications for biology and disease // Lab. Invest.
2007. V. 87. P. 851-857.
6 Rudd P.M., Elliott T., Cresswell P., Wilson I.A. and Dwek R.A. Glycosylation and the immune system // Science. 2001. V. 291
P. 2370-6.
7 Wang X., Inoue S. and Gu J. Dysregulation of TGF-h1 receptor activation leads to abnormal lung development and
emphysema-like phenotype in core fucose-deficient mice // Proc Natl Acad Sci U S A. 2005. V. 102 P. 15791-6.
8 Tsuda T., Ikeda Y. and Taniguchi N. The Asn-420–linked sugar chain in human epidermal growth factor receptor suppresses
ligand-independent spontaneous oligomerization. Possible role of a specific sugar chain in controllable receptor activation // J. Biol.
Chem. 2000. V.275 P. 21988-94.
9 Looger L.L., Dwyer M.A., Smith J.J. and Hellinga H.W. Computational design of receptor and sensor proteins with novel
functions // Nature. 2003. V. 423 P. 185-90.
10 Hanash S.M., Pitteri S.J. and Faca V.M. Mining the plasma proteome for cancer biomarkers // Nature. 2009. V. 452 P. 571-79.
11 Dennis J.W., Nabi I.R. and Demetriou M. Metabolism, cell surface organization, and disease // Cell. 2009. V. 139. P. 1229-41.
12 Dube D.H. and Bertozzi C.R. Glycans in cancer and inflammation: potential for therapeutics and diagnostics // Nat. Rev. Drug
Discov. 2005. V. 4 P. 477-488.
13 Fuster M.M. and Esko J.D. The sweet and sour of cancer: glycans as novel therapeutic targets // Nat. Rev. Cancer. 2005. V. 5.
P. 526-42.
14 Geisler C. and Jarvis D.L. Letter to the Glyco-Forum: Effective glycoanalysis with Maackia amurensis lectins requires a clear
understanding of their binding specificities // Glycobiology. 2011. V. 21. P. 988-993.
2 Exfoliation D. Turns that favor glycosylation // Science. 2011. V. 331. P. 507.
3 Du J., Meledeo M.A., Wang Z., Khanna H.S., Paruchuri V.D.P., and Yarema K.J. Metabolic glycoengineering: Sialic acid and
beyond // Glycobiology. 2009. V. 12. P. 1382-1401.
4 Sharon N. Lectins: Carbohydrate-specific Reagents and Biological Recognition Molecules // J. Biol. Chem. 2007. V. 282. P.
2753-64.
5 Varki N.M. and Varki A. Diversity in cell surface sialic acid presentations: implications for biology and disease // Lab. Invest.
2007. V. 87. P. 851-857.
6 Rudd P.M., Elliott T., Cresswell P., Wilson I.A. and Dwek R.A. Glycosylation and the immune system // Science. 2001. V. 291
P. 2370-6.
7 Wang X., Inoue S. and Gu J. Dysregulation of TGF-h1 receptor activation leads to abnormal lung development and
emphysema-like phenotype in core fucose-deficient mice // Proc Natl Acad Sci U S A. 2005. V. 102 P. 15791-6.
8 Tsuda T., Ikeda Y. and Taniguchi N. The Asn-420–linked sugar chain in human epidermal growth factor receptor suppresses
ligand-independent spontaneous oligomerization. Possible role of a specific sugar chain in controllable receptor activation // J. Biol.
Chem. 2000. V.275 P. 21988-94.
9 Looger L.L., Dwyer M.A., Smith J.J. and Hellinga H.W. Computational design of receptor and sensor proteins with novel
functions // Nature. 2003. V. 423 P. 185-90.
10 Hanash S.M., Pitteri S.J. and Faca V.M. Mining the plasma proteome for cancer biomarkers // Nature. 2009. V. 452 P. 571-79.
11 Dennis J.W., Nabi I.R. and Demetriou M. Metabolism, cell surface organization, and disease // Cell. 2009. V. 139. P. 1229-41.
12 Dube D.H. and Bertozzi C.R. Glycans in cancer and inflammation: potential for therapeutics and diagnostics // Nat. Rev. Drug
Discov. 2005. V. 4 P. 477-488.
13 Fuster M.M. and Esko J.D. The sweet and sour of cancer: glycans as novel therapeutic targets // Nat. Rev. Cancer. 2005. V. 5.
P. 526-42.
14 Geisler C. and Jarvis D.L. Letter to the Glyco-Forum: Effective glycoanalysis with Maackia amurensis lectins requires a clear
understanding of their binding specificities // Glycobiology. 2011. V. 21. P. 988-993.
Загрузки
Выпуск
Раздел
ФИЗИОЛОГИЯ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ
