Новый быстрый метод определения молибден ксантиноксидазы молока животных

K. A. Dusembaev; M. S. Kulataeva; G. A. Shalakhmetova; Z. Alikulov

Авторлар

K. A. Dusembaev Л.Н. Гумилев атындағы Еуразия ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Астана қ.
M. S. Kulataeva Л.Н. Гумилев атындағы Еуразия ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Астана қ.
G. A. Shalakhmetova әл-Фараби атындағы Қазақ ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Алматы қ.
Z. Alikulov Л.Н. Гумилев атындағы Еуразия ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Астана қ.

Кілт сөздер:

нитратредуктаза, нитритредуктаза? ксантиноксидаза, сүт, молибден, дитиотреитол, сульфаниламид,

Аңдатпа

Молибденді фермент ксантиноксидазаның (КО) нитратредуктазалық (НаР) және нитритредуктазалық (НиР) активтіктерін зерттеулер ешкінің, түйенің және биенің сүтінің құрамындағы КО молибденсіз, сондықтан ол активтігі жоқ күйінде болатынын көрсетті. Біз сырттан берілген молибдат және тиолдарды қосып, 85^оС температурада 10 минут қыздыру арқылы сүттің КО-сын активтендіру әдісін ұсындық. Молибденнің атомдары молибденді кофактордың (-SH) топтарымен байланысады. Бірақ, ферментттің температуралық денатурациясы кезінде осы SН-топтар оттегімен тотығады. Сондықтан, сүтті темпераутрамен өңдеу кезінде кофактордың SН-топтарын қорғау үшін әртүрлі антиоксиданттар қолданылды. Нар және НиР-дің активтіктері тек нитриттің мөлшерімен анықталды, себебі: (1) нитрит НаР-дың каталитикалық реакциясының өнімі; ал НиР үшін нитрит субстрат болып табылады. Нитраттың мөлшерін анықтау үшін сульфаниламид және N-(1-нафтил)-этилендиаминді пайдаланады. Біз фосфат, дитиотреитол, аскорбат және дитионит секілді антиоксиданты қосқанда сульфаниламид молибдатты көк түске (сіңіру максимумы 695 нм) бояйтынын байқадық. Цистеин немесе глутатионды антиоксидант ретінде пайдаланғанда молибден сульфаниламидпен боялмады, яғни олар нитритті анықтауға кесір келтірмейді. Дитиотреитолды, фосфатты және сульфаниламидті пайдалану арқылы сырттан берілген молибдаттың қаймақтағы май глобулаларының мицеллаларының құрамындағы КО-ның молекуласына кіретіні анықталды.

Автор өмірбаяндары

K. A. Dusembaev, Л.Н. Гумилев атындағы Еуразия ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Астана қ.

Дюсембаев К.А. – магистр биотехнологии, научный сотрудник лаборатории клеточной биологии и биотехнологии кафедры биотехнологии и микробиологии Евразийского национального университета им. Л.Н.Гумилева, Астана
M. S. Kulataeva, Л.Н. Гумилев атындағы Еуразия ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Астана қ.

Кулатаева М.С. - магистрант кафедры биотехнологии и микробиологии Евразийского национального университета им. Л.Н.Гумилева, Астана
G. A. Shalakhmetova, әл-Фараби атындағы Қазақ ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Алматы қ.

Шалахметова Г.А. –и.о.доцента кафедры молекулярной биологии и генетики Казахского национального университета им. Аль-Фараби, Алматы
Z. Alikulov, Л.Н. Гумилев атындағы Еуразия ұлттық университеті, Қазақстан Республикасы, Астана қ.

Аликулов З. – и.о.профессора кафедры биотехнологии и микробиологии Евразийского национального университета им. Л.Н.Гумилева, Астана